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L'inquinamentu da cadmiu (Cd) rapprisenta una minaccia per a cultura di a pianta medicinale Panax notoginseng in a pruvincia di Yunnan. In cundizioni di stress esogenu di Cd, hè statu realizatu un esperimentu di campu per capisce l'effettu di l'applicazione di calce (0,750, 2250 è 3750 kg bm-2) è di a spruzzatura d'acidu ossalicu (0, 0,1 è 0,2 mol l-1) nantu à l'accumulazione di Cd. è azzione antioxidante Cumponenti sistemichi è medicinali chì affettanu u Panax notoginseng. I risultati anu dimustratu chì a calce viva è a spruzzatura fogliare cù acidu ossalicu puderia aumentà i livelli di Ca2+ in Panax notoginseng sottu stress di Cd è riduce a tossicità di Cd2+. L'aghjunta di calce è d'acidu ossalicu hà aumentatu l'attività di l'enzimi antioxidanti è hà alteratu u metabolismu di l'osmoregulatori. L'attività di CAT hè aumentata in modu più significativu, aumentendu di 2,77 volte. L'attività più alta di SOD hè aumentata di 1,78 volte quandu hè stata trattata cù acidu ossalicu. U cuntenutu di MDA hè diminuitu di 58,38%. Ci hè una currelazione assai significativa cù u zuccheru solubile, l'aminoacidu liberu, a prolina è e proteine ​​solubili. A calce è l'acidu ossalicu ponu aumentà l'ioni di calciu (Ca2+), diminuisce u Cd, migliurà a tolleranza à u stress in Panax notoginseng è aumentà a pruduzzione tutale di saponine è flavonoidi. U cuntenutu di Cd era u più bassu, 68,57% più bassu chè in u cuntrollu, chì currisponde à u valore standard (Cd≤0,5 mg/kg, GB/T 19086-2008). A proporzione di SPN era di 7,73%, chì hà righjuntu u livellu più altu di ogni trattamentu, è u cuntenutu di flavonoidi hè aumentatu significativamente di 21,74%, righjunghjendu u valore standard di a droga è u megliu rendimentu.
U cadmiu (Cd), cum'è un contaminante cumunu in u terrenu cultivatu, migra facilmente è hà una tossicità biologica significativa1. El Shafei et al. 2 anu signalatu chì a tossicità di u Cd affetta a qualità è a produttività di e piante aduprate. In l'ultimi anni, u fenomenu di l'eccessu di cadmiu in u terrenu di e terre cultivate in u suduveste di a Cina hè diventatu assai seriu. A Pruvincia di Yunnan hè u Regnu di Biodiversità di a Cina, trà u quale e spezie di piante medicinali sò à u primu postu in u paese. Tuttavia, e ricche risorse minerali di a Pruvincia di Yunnan portanu inevitabilmente à a contaminazione di u terrenu da metalli pesanti durante u prucessu di minera, ciò chì affetta a pruduzzione di piante medicinali lucali.
Panax notoginseng (Burkill) Chen3 hè una pianta medicinale perenne assai preziosa chì appartene à u genaru Araliaceae Panax ginseng. A radica di Panax notoginseng prumove a circulazione sanguigna, elimina a stasi di u sangue è allevia u dolore. U principale situ di pruduzzione hè a Prefettura di Wenshan, Pruvincia di Yunnan 5. A contaminazione da Cd era presente in più di u 75% di a superficia di u terrenu in a zona di piantazione di Panax notoginseng è hà superatu l'81-100% in diversi lochi6. L'effettu tossicu di u Cd riduce ancu assai a pruduzzione di cumpunenti medicinali di Panax notoginseng, in particulare saponine è flavonoidi. E saponine sò una classa di agliconi, frà i quali l'agliconi sò triterpenoidi o spirosterani, chì sò i principali ingredienti attivi di parechje medicine erboristiche cinesi è cuntenenu saponine. Alcune saponine anu ancu attività biologiche preziose cum'è l'attività antibatterica, antipiretica, sedativa è anticancerosa7. I flavonoidi si riferiscenu generalmente à una seria di cumposti in i quali dui anelli di benzene cù gruppi idrossilici fenolici sò ligati per mezu di trè atomi di carboniu cintrali, è u core principale hè 2-fenilcromanone 8. Hè un forte antioxidante, chì pò eliminà efficacemente i radicali liberi di l'ossigenu in e piante, inibisce l'essudazione di enzimi biologichi inflammatori, prumove a guarigione di e ferite è u sollievu di u dolore, è riduce i livelli di colesterolu. Hè unu di i principali ingredienti attivi di Panax Ginseng. Risolve u prublema di a contaminazione di u terrenu cù u cadmiu in e zone di pruduzzione di Panax notoginseng hè una cundizione necessaria per assicurà a pruduzzione di i so principali cumpunenti medicinali.
A calce hè unu di i passivanti cumuni per riparà a contaminazione di u terrenu da cadmiu in situ. Affetta l'adsorbimentu è a deposizione di Cd in u terrenu è riduce l'attività biologica di Cd in u terrenu aumentendu u pH è cambiendu a capacità di scambiu cationicu di u terrenu (CEC), a saturazione di sali di u terrenu (BS), l'efficienza di u putenziale redox di u terrenu (Eh)3,11. Inoltre, a calce furnisce una grande quantità di Ca2+, chì forma un antagonismu ionicu cù Cd2+, compete per i siti di adsorbimentu di e radiche, impedisce u trasportu di Cd à u germoglio è hà una bassa tossicità biologica. Cù l'aghjunta di 50 mmol l-1 Ca sottu stress di Cd, u trasportu di Cd in e foglie di sesamo hè statu inibitu è ​​l'accumulazione di Cd hè stata ridutta di l'80%. Numerosi studii cunnessi sò stati riportati nantu à u risu (Oryza sativa L.) è altre culture12,13.
Spruzzà e foglie di e culture per cuntrullà l'accumulazione di metalli pesanti hè un novu metudu per trattà i metalli pesanti in l'ultimi anni. U principiu hè principalmente ligatu à a reazione di chelazione in e cellule vegetali, chì face chì i metalli pesanti si depositinu nantu à a parete cellulare è inibisce l'assorbimentu di metalli pesanti da e piante14,15. Cum'è agente chelante stabile di l'acidu dicarbossilicu, l'acidu ossalicu pò chelà direttamente l'ioni di metalli pesanti in e piante, riducendu cusì a tossicità. Studi anu dimustratu chì l'acidu ossalicu in a soia pò chelà Cd2+ è liberà cristalli chì cuntenenu Cd attraversu e cellule apicali di i tricomi, riducendu i livelli di Cd2+ in u corpu16. L'acidu ossalicu pò regulà u pH di u terrenu, aumentà l'attività di superossidu dismutasi (SOD), perossidasi (POD) è catalasi (CAT), è regulà l'infiltrazione di zuccheru solubile, proteine ​​solubili, aminoacidi liberi è prolina. Modulatori metabolichi 17,18. E sustanze acide è l'eccessu di Ca2+ in e piante di ossalatu formanu precipitati di ossalatu di calciu sottu l'azione di e proteine ​​germinali. A regulazione di a cuncentrazione di Ca2+ in e piante pò regulà efficacemente l'acidu ossalicu dissoltu è u Ca2+ in e piante è evità l'accumulazione eccessiva di acidu ossalicu è Ca2+19,20.
A quantità di calce applicata hè unu di i fattori chjave chì influenzanu l'effettu di a restaurazione. Hè statu stabilitu chì u cunsumu di calce varieghja da 750 à 6000 kg·h·m−2. Per i terreni acidi cù pH 5.0-5.5, l'effettu di l'applicazione di calce à una dosa di 3000-6000 kg·h·m-2 era significativamente più altu chè à una dosa di 750 kg·h·m-221. Tuttavia, l'applicazione eccessiva di calce pruvucarà alcuni effetti negativi nantu à u terrenu, cum'è grandi cambiamenti in u pH di u terrenu è a cumpattazione di u terrenu22. Dunque, avemu stabilitu i livelli di trattamentu CaO cum'è 0, 750, 2250 è 3750 kg·h·m−2. Quandu l'acidu ossalicu hè statu applicatu à Arabidopsis, u Ca2+ hè statu significativamente riduttu à 10 mM L-1, è a famiglia di geni CRT chì influenza a segnalazione Ca2+ era fortemente reattiva20. L'accumulazione di certi studii precedenti ci hà permessu di determinà a cuncentrazione di questu esperimentu è di cuntinuà à studià l'interazione di additivi esogeni nantu à Ca2+ è Cd2+23,24,25. Cusì, questu studiu hà per scopu d'investigà u mecanismu regulatoriu di l'effetti di l'applicazione topica di calce è a spruzzatura fogliare di l'acidu ossalicu nantu à u cuntenutu di Cd è a tolleranza à u stress di Panax notoginseng in terreni contaminati da Cd, è di esplorà ulteriormente i migliori modi è mezi di garanzia di qualità medicinale. Surtita Panax notoginseng. Fornisce informazioni preziose per guidà l'espansione di a cultura erbacea in terreni contaminati da cadmiu è a furnitura di una pruduzzione sustenibile di alta qualità per risponde à a dumanda di u mercatu per i medicinali.
Utilizendu a varietà lucale Wenshan notoginseng cum'è materiale, hè statu realizatu un esperimentu di campu in Lannizhai (24°11′N, 104°3′E, altitudine 1446m), Contea di Qiubei, Prefettura di Wenshan, Pruvincia di Yunnan. A temperatura media annuale hè di 17°C è a precipitazione media annuale hè di 1250 mm. Valori di fondu di u terrenu studiatu: TN 0,57 g kg-1, TP 1,64 g kg-1, TC 16,31 g kg-1, RH 31,86 g kg-1, N idrolizzatu alcalinu 88,82 mg kg-1, P efficace 18,55 mg kg-1, K dispunibule 100,37 mg kg-1, Cd tutale 0,3 mg kg-1 è pH 5,4.
U 10 di dicembre, 6 mg/kg Cd2+ (CdCl2 2.5H2O) è calce (0.750, 2250 è 3750 kg h m-2) sò stati applicati è mischiati cù a terra superficiale 0-10 cm in ogni parcella, 2017. Ogni trattamentu hè statu ripetutu 3 volte. E parcelle sperimentali sò state situate à casu, l'area di ogni parcella era di 3 m2. E piantine di Panax notoginseng di un annu sò state trasplantate dopu à 15 ghjorni di cultura in terra. Quandu si utilizanu reti d'ombreggiatura, l'intensità luminosa di Panax notoginseng in a chioma d'ombreggiatura hè circa u 18% di l'intensità luminosa naturale nurmale. Cresce secondu i metudi di crescita tradiziunali lucali. À a fase di maturità di Panax notoginseng in u 2019, l'acidu ossalicu serà spruzzatu cum'è ossalatu di sodiu. A cuncentrazione di l'acidu ossalicu era 0, 0,1 è 0,2 mol l-1, rispettivamente, è u pH hè statu aghjustatu à 5,16 cù NaOH per imità u pH mediu di u filtratu di detriti. Spruzzate e superfici superiori è inferiori di e foglie una volta à settimana à 8 ore. Dopu avè spruzzatu 4 volte, e piante di Panax notoginseng di 3 anni sò state raccolte à a settimana 5.
In nuvembre 2019, piante di Panax notoginseng di trè anni trattate cù l'acidu ossalicu sò state raccolte in u campu. Alcuni campioni di piante di Panax notoginseng di 3 anni da testà per u metabolismu fisiologicu è l'attività enzimatica sò stati posti in tubi di congelatore, congelati rapidamente in azotu liquidu, è poi trasferiti in un frigorifero à -80 ° C. A parte di u stadiu maturu deve esse determinata in i campioni di radiche per u Cd è u cuntenutu di l'ingredientu attivu. Dopu avè lavatu cù acqua di rubinettu, asciugate à 105 ° C per 30 minuti, mantene a massa à 75 ° C è macinate i campioni in un mortaiu.
Pesate 0,2 g di campioni di piante secche in un matrazzu Erlenmeyer, aghjunghjite 8 ml di HNO3 è 2 ml di HClO4 è chjude cù u tappu per tutta a notte. U ghjornu dopu, l'imbutu cù un collu curvu hè piazzatu in un matrazzu triangolare per a decomposizione elettrotermica finu à chì appare u fume biancu è a soluzione di decomposizione diventa chjara. Dopu u raffreddamentu à temperatura ambiente, a mistura hè stata trasferita in un matrazzu volumetricu di 10 ml. U cuntenutu di Cd hè statu determinatu nantu à un spettrometru di assorbimentu atomicu (Thermo ICE™ 3300 AAS, USA). (GB/T 23739-2009).
Pesate 0,2 g di campioni di piante secche in una buttiglia di plastica di 50 ml, aghjunghjite 10 ml di 1 mol l-1 HCL, chjude è scuzzulate per 15 ore è filtrate. Usendu una pipetta, aspirate a quantità necessaria di filtratu per a diluzione adatta è aghjunghjite a suluzione di SrCl2 per purtà a cuncentrazione di Sr2+ à 1 g L–1. U cuntenutu di Ca hè statu determinatu aduprendu un spettrometru d'assorbimentu atomicu (Thermo ICE™ 3300 AAS, USA).
Metudu di kit di riferimentu per a malondialdeide (MDA), a superossidu dismutasi (SOD), a perossidasi (POD) è a catalasi (CAT) (DNM-9602, Beijing Pulang New Technology Co., Ltd., numeru di registrazione di u produttu), aduprate u kit di misurazione currispundente N °: Jingyaodianji (quasi) parola 2013 N ° 2400147).
Pesate 0,05 g di u campione di Panax notoginseng è aghjunghjite u reagente antrone-acidu sulfuricu longu à u latu di u tubu. Scuzzulate u tubu per 2-3 secondi per mischjà bè u liquidu. Pone u tubu nantu à u rack per tubi di prova per 15 minuti. U cuntenutu di zuccheri solubili hè statu determinatu utilizendu a spettrofotometria UV-visibile (UV-5800, Shanghai Yuanxi Instrument Co., Ltd., Cina) à una lunghezza d'onda di 620 nm.
Pesà 0,5 g di un campione frescu di Panax notoginseng, macinallu finu à ottene un omogeneizatu cù 5 ml d'acqua distillata è centrifugà à 10.000 g per 10 minuti. Diluire u surnatante à un vulume fissu. Hè statu utilizatu u metudu Coomassie Brilliant Blue. U cuntenutu di proteine ​​solubili hè statu determinatu utilizendu a spettrofotometria in e regioni ultraviolette è visibili di u spettru (UV-5800, Shanghai Yuanxi Instrument Co., Ltd., Cina) à una lunghezza d'onda di 595 nm è calculatu da a curva standard di l'albumina sierica bovina.
Pesà 0,5 g di campione frescu, aghjunghje 5 ml d'acidu aceticu à 10% per macinà è omogenizà, filtrà è diluisce à vulume costante. Metudu cromogenicu cù una soluzione di ninidrina. U cuntenutu di aminoacidi liberi hè statu determinatu per spettrofotometria ultravioletta-visibile (UV-5800, Shanghai Yuanxi Instrument Co., Ltd., Cina) à una lunghezza d'onda di 570 nm è calculatu da a curva standard di leucina.
Pesate 0,5 g di un campione frescu, aghjunghjite 5 ml di una suluzione à 3% d'acidu sulfosalicylicu, scaldate in un bagnu d'acqua è scuzzulate per 10 minuti. Dopu u raffreddamentu, a suluzione hè stata filtrata è diluita à un vulume costante. Hè statu utilizatu u metudu cromogenicu di a ninidrina acida. U cuntenutu di prolina hè statu determinatu per spettrofotometria UV-visibile (UV-5800, Shanghai Yuanxi Instrument Co., Ltd., Cina) à una lunghezza d'onda di 520 nm è calculatu da a curva standard di a prolina.
U cuntenutu di saponine hè statu determinatu da a cromatografia liquida d'alta prestazione (HPLC) in cunfurmità cù a Farmacopea di a Republica Pupulare Cinese (edizione 2015). U principiu basicu di l'HPLC hè di utilizà un liquidu à alta pressione cum'è fase mobile è di applicà una tecnulugia di separazione altamente efficiente nantu à una colonna di fase stazionaria per e particelle ultrafine. E cumpetenze operative sò e seguenti:
Cundizioni HPLC è prova di idoneità di u sistema (Tavula 1): L'eluzione à gradiente hè stata realizata secondu a tavula seguente, aduprendu gel di silice ligatu cù ottadecilsilanu cum'è riempitivu, acetonitrile cum'è fase mobile A, acqua cum'è fase mobile B, è a lunghezza d'onda di rilevazione era di 203 nm. U numeru di tazze teoriche calculate da u piccu R1 di e saponine di Panax notoginseng deve esse almenu 4000.
Preparazione di a suluzione di riferimentu: Pesà accuratamente i ginsenosidi Rg1, i ginsenosidi Rb1 è i notoginsenosidi R1, aghjunghje metanolu per ottene una suluzione mista di 0,4 mg di ginsenoside Rg1, 0,4 mg di ginsenoside Rb1 è 0,1 mg di notoginsenoside R1 per ml.
Preparazione di a suluzione di prova: Pesate 0,6 g di polvere di Sanxin è aghjunghjite 50 ml di metanolu. A mistura hè stata pesata (W1) è lasciata per tutta a notte. A suluzione mischiata hè stata poi ligeramente bollita in un bagnu d'acqua à 80° C per 2 ore. Dopu u raffreddamentu, pesate a suluzione mischiata è aghjunghjite u metanolu risultante à a prima massa di W1. Poi scuzzulate bè è filtrate. U filtratu hè statu lasciatu per a determinazione.
U cuntenutu di saponina hè statu assorbitu accuratamente da 10 µl di a suluzione standard è 10 µl di u filtratu è iniettatu in HPLC (Thermo HPLC-ultimate 3000, Seymour Fisher Technology Co., Ltd.)24.
Curva standard: determinazione di a suluzione standard mischiata Rg1, Rb1, R1, e cundizioni cromatografiche sò listesse cum'è sopra. Calcule a curva standard cù l'area di u piccu misurata nantu à l'asse y è a cuncentrazione di saponina in a suluzione standard nantu à l'ascissa. Inserite l'area di u piccu misurata di u campione in a curva standard per calculà a cuncentrazione di saponina.
Pesate un campione di 0,1 g di P. notogensings è aghjunghjite 50 ml di soluzione di CH3OH à 70%. Sonicate per 2 ore, poi centrifugate à 4000 rpm per 10 minuti. Pigliate 1 ml di u surnatante è diluitelu 12 volte. U cuntenutu di flavonoidi hè statu determinatu per spettrofotometria ultravioletta-visibile (UV-5800, Shanghai Yuanxi Instrument Co., Ltd., Cina) à una lunghezza d'onda di 249 nm. A quercetina hè una sustanza abbundante standard8.
I dati sò stati urganizati cù u software Excel 2010. L'analisi di a varianza di i dati hè stata valutata cù u software SPSS Statistics 20. Imagine disegnata da Origin Pro 9.1. E statistiche calculate includenu a media ± deviazione standard. E dichjarazioni di significatività statistica sò basate annantu à P <0,05.
In u casu di a spruzzatura fogliare cù a listessa cuncentrazione d'acidu ossalicu, u cuntenutu di Ca in e radiche di Panax notoginseng hè aumentatu significativamente cù l'aumentu di l'applicazione di calce (Tavula 2). Paragunatu à nisuna applicazione di calce, u cuntenutu di Ca hè aumentatu di 212% à 3750 kg ppm di calce senza spruzzatura d'acidu ossalicu. À a listessa velocità d'applicazione di calce, u cuntenutu di calciu hè aumentatu ligeramente cù l'aumentu di a cuncentrazione d'acidu ossalicu spruzzatu.
U cuntenutu di Cd in e radiche variava da 0,22 à 0,70 mg/kg. À a listessa cuncentrazione di spruzzatura d'acidu ossalicu, u cuntenutu di 2250 kg hm-2 Cd hè diminuitu significativamente cù l'aumentu di a velocità d'applicazione di calce. Paragunatu à u cuntrollu, quandu si spruzzavanu e radiche cù 2250 kg gm-2 calce è 0,1 mol l-1 acidu ossalicu, u cuntenutu di Cd hè diminuitu di 68,57%. Quandu hè applicatu senza calce è 750 kg hm-2 calce, u cuntenutu di Cd in e radiche di Panax notoginseng hè diminuitu significativamente cù l'aumentu di a cuncentrazione di spruzzatura d'acidu ossalicu. Cù l'introduzione di 2250 kg di calce gm-2 è 3750 kg di calce gm-2, u cuntenutu di Cd in a radica hè prima diminuitu è ​​dopu aumentatu cù un aumentu di a cuncentrazione di acidu ossalicu. Inoltre, l'analisi 2D hà dimustratu chì u cuntenutu di Ca in a radica di Panax notoginseng era significativamente affettatu da a calce (F = 82,84**), u cuntenutu di Cd in a radica di Panax notoginseng era significativamente affettatu da a calce (F = 74,99**) è l'acidu ossalicu. (F = 74,99**). F = 7,72*).
Cù un aumentu di a velocità d'applicazione di calce è di a cuncentrazione di spruzzatura cù l'acidu ossalicu, u cuntenutu di MDA hè diminuitu significativamente. Nisuna differenza significativa hè stata trovata in u cuntenutu di MDA trà e radiche di Panax notoginseng trattate cù calce è 3750 kg g/m2 di calce. À velocità d'applicazione di 750 kg hm-2 è 2250 kg hm-2 di calce, u cuntenutu di MDA in 0,2 mol l-1 d'acidu ossalicu quandu hè statu spruzzatu era 58,38% è 40,21% più bassu chè in l'acidu ossalicu micca spruzzatu, rispettivamente. U cuntenutu di MDA (7,57 nmol g-1) era u più bassu quandu sò stati aghjunti 750 kg di calce hm-2 è 0,2 mol l-1 d'acidu ossalicu (Fig. 1).
Effettu di a spruzzatura di e foglie cù l'acidu ossalicu nantu à u cuntenutu di malondialdeide in e radiche di Panax notoginseng sottu stress di cadmiu [J]. P<0,05). Listessu quì sottu.
À l'eccezzione di l'applicazione di 3750 kg h m-2 di calce, ùn hè stata osservata alcuna differenza significativa in l'attività SOD di u sistema radicale di Panax notoginseng. Quandu si usa calce 0, 750 è 2250 kg hm-2, l'attività di SOD quandu si spruzza 0,2 mol l-1 d'acidu ossalicu era significativamente più alta chè in assenza di trattamentu cù acidu ossalicu, chì hè aumentata rispettivamente di 177,89%, 61,62% è 45,08%. L'attività SOD (598,18 unità g-1) in e radiche era più alta quandu trattate senza calce è spruzzate cù 0,2 mol l-1 d'acidu ossalicu. À a listessa cuncentrazione senza acidu ossalicu o spruzzate cù 0,1 mol l-1 d'acidu ossalicu, l'attività SOD hè aumentata cù l'aumentu di a quantità d'applicazione di calce. L'attività SOD hè diminuita significativamente dopu a spruzzatura cù 0,2 mol L-1 d'acidu ossalicu (Fig. 2).
Effettu di a spruzzatura di e foglie cù l'acidu ossalicu nantu à l'attività di a superossidu dismutasi, a perossidasi è a catalasi in e radiche di Panax notoginseng sottu stress di cadmiu [J].
Simile à l'attività di SOD in e radiche, l'attività di POD in e radiche (63,33 µmol g-1) era a più alta quandu hè stata spruzzata senza calce è 0,2 mol L-1 d'acidu ossalicu, chì era 148,35% più altu ch'è u cuntrollu (25,50 µmol g-1). L'attività di POD hè prima aumentata è dopu diminuita cù l'aumentu di a cuncentrazione di spruzzatura d'acidu ossalicu è u trattamentu cù calce di 3750 kg hm-2. Paragunatu à u trattamentu cù 0,1 mol l-1 d'acidu ossalicu, l'attività di POD hè diminuita di 36,31% quandu hè stata trattata cù 0,2 mol l-1 d'acidu ossalicu (Fig. 2).
Eccettu per a spruzzatura di 0,2 mol l-1 d'acidu ossalicu è l'applicazione di 2250 kg hm-2 o 3750 kg hm-2 di calce, l'attività CAT era significativamente più alta chè u cuntrollu. L'attività CAT di u trattamentu cù 0,1 mol l-1 d'acidu ossalicu è u trattamentu cù calce 0,2250 kg h m-2 o 3750 kg h m-2 hè aumentata rispettivamente di 276,08%, 276,69% ​​è 33,05% paragunatu à nisun trattamentu cù acidu ossalicu. L'attività CAT di e radiche (803,52 µmol g-1) trattate cù 0,2 mol l-1 d'acidu ossalicu era a più alta. L'attività CAT (172,88 µmol g-1) era a più bassa in u trattamentu di 3750 kg hm-2 di calce è 0,2 mol l-1 d'acidu ossalicu (Fig. 2).
L'analisi bivariata hà dimustratu chì l'attività CAT di Panax notoginseng è l'MDA eranu significativamente correlate cù a quantità di acidu ossalicu o di spruzzatura di calce è cù i dui trattamenti (Tavula 3). L'attività SOD in e radiche era altamente correlata cù u trattamentu di calce è acidu ossalicu o cù a cuncentrazione di spruzzatura di acidu ossalicu. L'attività POD di e radiche era significativamente correlata cù a quantità di calce applicata o cù l'applicazione simultanea di calce è acidu ossalicu.
U cuntenutu di zuccheri solubili in e radiche hè diminuitu cù un aumentu di a velocità d'applicazione di calce è di a cuncentrazione di spruzzatura cù acidu ossalicu. Ùn ci era nisuna differenza significativa in u cuntenutu di zuccheri solubili in e radiche di Panax notoginseng senza l'applicazione di calce è cù l'applicazione di 750 kg·h·m−2 di calce. Quandu si applicanu 2250 kg hm-2 di calce, u cuntenutu di zuccheru solubile quandu hè statu trattatu cù 0,2 mol l-1 d'acidu ossalicu era significativamente più altu chè quandu si spruzza cù acidu non ossalicu, chì hè aumentatu di 22,81%. Quandu si applica a calce in a quantità di 3750 kg·h·m-2, u cuntenutu di zuccheri solubili hè diminuitu significativamente cù un aumentu di a cuncentrazione di spruzzatura cù acidu ossalicu. U cuntenutu di zuccheru solubile di u trattamentu di spruzzatura cù acidu ossalicu 0,2 mol L-1 era 38,77% inferiore à quellu di u trattamentu senza trattamentu cù acidu ossalicu. Inoltre, u trattamentu à spruzzatura cù 0,2 mol l-1 d'acidu ossalicu avia u più bassu cuntenutu di zuccheru solubile di 205,80 mg g-1 (Fig. 3).
Effettu di a spruzzatura di e foglie cù l'acidu ossalicu nantu à u cuntenutu di zuccheru tutale solubile è di proteine ​​solubili in e radiche di Panax notoginseng sottu stress di cadmiu [J].
U cuntenutu di proteine ​​solubili in e radiche hè diminuitu cù un aumentu di a velocità di applicazione di calce è acidu ossalicu. In assenza di calce, u cuntenutu di proteine ​​solubili in u trattamentu di spruzzatura cù 0,2 mol l-1 d'acidu ossalicu era significativamente più bassu chè in u cuntrollu, di 16,20%. Quandu si applicava calce 750 kg hm-2, ùn hè stata osservata alcuna differenza significativa in u cuntenutu di proteine ​​solubili in e radiche di Panax notoginseng. À una velocità di applicazione di calce di 2250 kg h m-2, u cuntenutu di proteine ​​solubili in u trattamentu di spruzzatura cù acidu ossalicu di 0,2 mol l-1 era significativamente più altu chè in u trattamentu di spruzzatura senza acidu ossalicu (35,11%). Quandu a calce hè stata applicata à 3750 kg h m-2, u cuntenutu di proteine ​​solubili hè diminuitu significativamente cù l'aumentu di a cuncentrazione di spruzzatura cù acidu ossalicu, è u cuntenutu di proteine ​​solubili (269,84 µg g-1) era u più bassu quandu si trattava à 0,2 mol l-1.1 spruzzendu cù acidu ossalicu (Fig. 3).
Nisuna differenza significativa in u cuntenutu di aminoacidi liberi in e radiche di Panax notoginseng in assenza di calce hè stata trovata. Cù un aumentu di a cuncentrazione di spruzzatura cù acidu ossalicu è una velocità di applicazione di calce di 750 kg hm-2, u cuntenutu di aminoacidi liberi hè prima diminuitu è ​​dopu hè aumentatu. L'applicazione di u trattamentu cù 2250 kg hm-2 calce è 0,2 mol l-1 acidu ossalicu hà aumentatu significativamente u cuntenutu di aminoacidi liberi di 33,58% paragunatu à nisun trattamentu cù acidu ossalicu. Cù un aumentu di a cuncentrazione di spruzzatura cù acidu ossalicu è l'introduzione di 3750 kg·hm-2 di calce, u cuntenutu di aminoacidi liberi hè diminuitu significativamente. U cuntenutu di aminoacidi liberi in u trattamentu di spruzzatura cù acidu ossalicu 0,2 mol L-1 era 49,76% più bassu chè in u trattamentu senza trattamentu cù acidu ossalicu. U cuntenutu di aminoacidi liberi era massimu quandu trattatu senza trattamentu cù acidu ossalicu è era di 2,09 mg/g. U cuntenutu di aminoacidi liberi (1,05 mg g-1) era u più bassu quandu hè statu spruzzatu cù 0,2 mol l-1 d'acidu ossalicu (Fig. 4).
Effettu di a spruzzatura di e foglie cù l'acidu ossalicu nantu à u cuntenutu di aminoacidi liberi è prolina in e radiche di Panax notoginseng in cundizioni di stress di cadmiu [J].
U cuntenutu di prolina in e radiche hè diminuitu cù un aumentu di a velocità d'applicazione di calce è acidu ossalicu. Ùn ci era nisuna differenza significativa in u cuntenutu di prolina di Panax notoginseng in assenza di calce. Cù un aumentu di a cuncentrazione di spruzzatura cù acidu ossalicu è velocità d'applicazione di calce di 750, 2250 kg hm-2, u cuntenutu di prolina hè prima diminuitu è ​​dopu aumentatu. U cuntenutu di prolina in u trattamentu di spruzzatura cù acidu ossalicu 0,2 mol l-1 era significativamente più altu chè u cuntenutu di prolina in u trattamentu di spruzzatura cù acidu ossalicu 0,1 mol l-1, chì hè aumentatu rispettivamente di 19,52% è 44,33%. Quandu si applicanu 3750 kg·hm-2 di calce, u cuntenutu di prolina hè diminuitu significativamente cù un aumentu di a cuncentrazione di spruzzatura cù acidu ossalicu. U cuntenutu di prolina dopu a spruzzatura cù acidu ossalicu 0,2 mol l-1 era 54,68% più bassu chè senza acidu ossalicu. U cuntenutu di prolina era u più bassu è s'hè elevatu à 11,37 μg/g dopu u trattamentu cù 0,2 mol/l d'acidu ossalicu (Fig. 4).
U cuntenutu di saponine totali in Panax notoginseng era Rg1>Rb1>R1. Ùn ci era nisuna differenza significativa in u cuntenutu di e trè saponine cù a cuncentrazione crescente di spray d'acidu ossalicu è senza calce (Tavula 4).
U cuntenutu di R1 quandu si spruzza 0,2 mol l-1 d'acidu ossalicu era significativamente più bassu chè in assenza di spruzzatura d'acidu ossalicu è aduprendu calce 750 o 3750 kg·h·m-2. Cù una cuncentrazione di spruzzatura d'acidu ossalicu di 0 o 0,1 mol l-1, ùn ci era nisuna differenza significativa in u cuntenutu di R1 cù un aumentu di a velocità d'applicazione di calce. À una cuncentrazione di spruzzatura d'acidu ossalicu di 0,2 mol l-1, u cuntenutu di R1 di 3750 kg hm-2 di calce era significativamente più bassu chè quellu di 43,84% senza calce (Tavula 4).
U cuntenutu di Rg1 hè prima aumentatu è dopu diminuitu cù l'aumentu di a cuncentrazione di spruzzatura cù l'acidu ossalicu è a velocità di applicazione di calce di 750 kg·h·m−2. À una velocità di applicazione di calce di 2250 o 3750 kg h m-2, u cuntenutu di Rg1 hè diminuitu cù l'aumentu di a cuncentrazione di spruzzatura di l'acidu ossalicu. À a listessa cuncentrazione di spruzzatura di l'acidu ossalicu, u cuntenutu di Rg1 hè prima aumentatu è dopu diminuitu cù un aumentu di a velocità di applicazione di calce. In paragone cù u cuntrollu, eccettu per trè cuncentrazioni di spruzzatura di l'acidu ossalicu è 750 kg h m-2, u cuntenutu di Rg1 era più altu chè u cuntrollu, u cuntenutu di Rg1 in e radiche di altri trattamenti era più bassu chè u cuntrollu. U cuntenutu di Rg1 era u più altu quandu spruzzatu cù 750 kg gm-2 calce è 0,1 mol l-1 acidu ossalicu, chì era 11,54% più altu chè u cuntrollu (Tavula 4).
U cuntenutu di Rb1 hè prima aumentatu è dopu diminuitu cù l'aumentu di a cuncentrazione di spruzzatura cù l'acidu ossalicu è a velocità di applicazione di calce di 2250 kg hm-2. Dopu avè spruzzatu 0,1 mol l-1 d'acidu ossalicu, u cuntenutu di Rb1 hà righjuntu un massimu di 3,46%, chì hè 74,75% più altu chè senza spruzzatura d'acidu ossalicu. Cù altri trattamenti cù calce, ùn ci era nisuna differenza significativa trà e diverse cuncentrazioni di spruzzatura d'acidu ossalicu. Quandu hè statu spruzzatu cù 0,1 è 0,2 mol l-1 d'acidu ossalicu, u cuntenutu di Rb1 hè prima diminuitu, è dopu diminuitu cù l'aumentu di a quantità di calce aghjunta (tabella 4).
À a listessa cuncentrazione d'acidu ossalicu spruzzatu, u cuntenutu di flavonoidi hè prima aumentatu è dopu diminuitu cù un aumentu di a velocità d'applicazione di calce. Nisuna calce o 3750 kg hm-2 calce spruzzata cù diverse cuncentrazioni d'acidu ossalicu hà avutu una differenza significativa in u cuntenutu di flavonoidi. Quandu a calce hè stata applicata à una velocità di 750 è 2250 kg h m-2, u cuntenutu di flavonoidi hè prima aumentatu è dopu diminuitu cù un aumentu di a cuncentrazione di spruzzatura cù acidu ossalicu. Quandu hè statu trattatu cù una velocità d'applicazione di 750 kg hm-2 è spruzzatu cù 0,1 mol l-1 d'acidu ossalicu, u cuntenutu di flavonoidi era u più altu è ammuntava à 4,38 mg g-1, chì hè 18,38% più altu chè a calce à a listessa velocità d'applicazione senza spruzzà cù acidu ossalicu. U cuntenutu di flavonoidi durante a spruzzatura cù l'acidu ossalicu 0,1 mol l-1 hè aumentatu di 21,74% paragunatu à u trattamentu senza spruzzatura cù l'acidu ossalicu è u trattamentu cù calce cù 2250 kg hm-2 (Fig. 5).
Effettu di a spruzzatura fogliare di ossalatu nantu à u cuntenutu di flavonoidi in e radiche di Panax notoginseng sottu stress di cadmiu [J].
L'analisi bivariata hà dimustratu chì u cuntenutu di zuccheru solubile di Panax notoginseng era significativamente currelatu cù a quantità di calce applicata è a cuncentrazione di l'acidu ossalicu spruzzatu. U cuntenutu di proteine ​​solubili in e radiche era significativamente currelatu cù u tassu d'applicazione di calce, sia calce sia acidu ossalicu. U cuntenutu d'aminoacidi liberi è di prolina in e radiche era significativamente currelatu cù u tassu d'applicazione di calce, a cuncentrazione di spruzzatura cù acidu ossalicu, calce è acidu ossalicu (Tavula 5).
U cuntenutu di R1 in e radiche di Panax notoginseng era significativamente currelatu cù a cuncentrazione di spruzzatura cù l'acidu ossalicu, a quantità di calce applicata, calce è acidu ossalicu. U cuntenutu di flavonoidi era significativamente currelatu cù a cuncentrazione di l'acidu ossalicu spruzzatu è a quantità di calce applicata.
Parechje emendamenti sò stati aduprati per riduce u Cd di e piante immobilizendu u Cd in u terrenu, cum'è a calce è l'acidu ossalicu30. A calce hè largamente aduprata cum'è additivu di u terrenu per riduce u cuntenutu di cadmiu in e culture31. Liang et al.32 anu signalatu chì l'acidu ossalicu pò ancu esse adupratu per restaurà i terreni contaminati da metalli pesanti. Dopu avè applicatu diverse concentrazioni di acidu ossalicu à u terrenu contaminatu, a materia urganica di u terrenu hè aumentata, a capacità di scambiu cationicu hè diminuita è u valore di pH hè aumentatu di 33. L'acidu ossalicu pò ancu reagisce cù l'ioni metallichi in u terrenu. Sottu à u stress di Cd, u cuntenutu di Cd in Panax notoginseng hè aumentatu significativamente paragunatu à u cuntrollu. Tuttavia, quandu a calce hè stata aduprata, hè diminuitu significativamente. In questu studiu, quandu si applicanu 750 kg hm-2 di calce, u cuntenutu di Cd in a radica hà righjuntu u standard naziunale (limite di Cd: Cd≤0,5 mg/kg, AQSIQ, GB/T 19086-200834), è l'effettu quandu si applicanu 2250 kg hm−2 di calce funziona megliu cù a calce. L'applicazione di calce hà creatu un gran numeru di siti di cumpetizione trà Ca2+ è Cd2+ in u tarrenu, è l'aghjunta di l'acidu ossalicu puderia riduce u cuntenutu di Cd in e radiche di Panax notoginseng. Tuttavia, u cuntenutu di Cd di e radiche di Panax notoginseng hè statu significativamente riduttu da a cumbinazione di calce è acidu ossalicu, righjunghjendu u standard naziunale. U Ca2+ in u tarrenu hè adsorbitu nantu à a superficia di a radica durante u flussu di massa è pò esse assorbitu da e cellule radicali attraversu i canali di calciu (canali Ca2+), e pompe di calciu (Ca2+-AT-Pase) è l'antiportatori Ca2+/H+, è dopu trasportatu orizzontalmente à u xilema radicale 23. U cuntenutu di Ca di a radica era significativamente correlatu negativamente cù u cuntenutu di Cd (P<0,05). U cuntenutu di Cd hè diminuitu cù un aumentu di u cuntenutu di Ca, chì hè coerente cù l'opinione nantu à l'antagonismu di Ca è Cd. L'analisi di a varianza hà dimustratu chì a quantità di calce hà influenzatu significativamente u cuntenutu di Ca in e radiche di Panax notoginseng. Pongrac et al. 35 hà signalatu chì u Cd si lega à l'ossalatu in i cristalli d'ossalatu di calciu è cumpete cù u Ca. Tuttavia, a regulazione di u Ca da l'ossalatu ùn era micca significativa. Questu hà dimustratu chì a precipitazione di l'ossalatu di calciu furmatu da l'acidu ossalicu è u Ca2+ ùn era micca una precipitazione simplice, è u prucessu di co-precipitazione pò esse cuntrullatu da diverse vie metaboliche.